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5分钟带你看懂DEX与CEX的区别 - 知乎

5分钟带你看懂DEX与CEX的区别 - 知乎切换模式写文章登录/注册5分钟带你看懂DEX与CEX的区别Columbu哥伦布区块链——构建新型社会信用体系，打造价值互联网底层基础设施。一、什么是DEX和CEXCEX即为中心化交易所，是集传统交易所、券商和投资银行的功能为一体的平台，以币安、火币、OKCoin交易所为代表，CEX聚集了庞大的用户量和交易量，也带来了足够的交易深度，提供了充分的资产流动性。DEX全称Decentralized exchange（去中心化交易所）是一个基于区块链的交易所，它不将用户资金和个人数据存储在服务器上，而只是作为一种基础设施来匹配希望买卖数字资产的买家和卖家。在匹配引擎的帮助下，这种交易直接发生在参与者(点对点)之间。5分钟带你看懂DEX与CEX的区别二、CEX与DEX交易流程对比交易所的核心环节一般包括充提、下单、订单撮合、资金结算和提现。CEX均由交易平台本身撮合完成；DEX则是把上述所有环节都置于链上，由智能合约执行全部操作，这样用户的交易过程就无需任何可信任的第三方。CEX以币安交易所为例1.用户注册户名并设置密码进入交易所，此过程一般需KYC；2.当用户有充值代币需求，可选择“法币”菜单进行购买虚拟货币或使用自己的钱包地址向自己的交易所地址充值，所有的币会自动转入交易所的地址。3.当用户有交易需求，需向交易所提出交易指令，交易所中心化服务器进行交易撮合（中心撮合或者集中撮合），成交后将结果告诉用户。4.当用户有提现需求，可向交易所提出提现指令，由上述的步骤可知，所有的币都在交易所的地址里，所以提币的过程是由交易所的地址转向用户钱包地址。DEX以CoinDEX交易所为例1.用户在CoinDEX上，用户创建好地址后，私钥将会由自持，平台方无权限也无能力获取用户私钥。2.随后通过授权智能合约，进行订单提交，提交的订单将会汇集到CoinDEX的订单池中，以供其他用户查看。3.当其他用户找对价格适合的订单后，可以选择执行该订单，提交到CoinDEX的服务端，确认无误后，相关交易信息将会进行上链，整个交易流程通过智能合约完成。4.订单池到用户执行订单通过P2P通信，最后提交到服务端，链下执行订单。最后一部执行是上链操作，上链成功后，将会由系统通知用户该笔订单已完成的信息。三、DEX与CEX区别5分钟带你看懂DEX与CEX的区别1.从资产安全角度，CEX钱包存放着所有用户的资金，由于资金量庞大，很容易招来黑客的攻击，一旦出现问题几乎所有用户都要遭受损失；在DEX平台中，用户的资产不是由平台方来管存，而是由智能合约来管理。交易时平台方不触碰用户资产，用户的资产也无需充值到平台中，用户的交易操作都是点对点的交易，订单操作需要交易者用私钥签名，撮合成功后通过智能合约验证，资产直接到账钱包，无需提现，平台只负责交易流动。2.从资产控制权角度，在CEX中，用户资产将由平台掌控，用户需要将自己的资产充值到交易平台的钱包。中心化交易平台的资产托管功能，就像银行一样，用户把钱存在银行，银行给用户一个账号，记录用户资金情况，银行对用户的资金有绝对的控制权；在DEX，用户的资产完全由自己掌控。DEX并不提供资金托管服务，所以也就无法控制、转移用户的资金。3.从交易速度角度，在CEX中，由于交易数据不上链，所以只要有匹配的对手单，成交速度极快；DEX则是完全由区块链支持的，每一个交易订单，每一个状态的变化都将作为交易记录在区块链网络中，往往会导致流动性差、成本高、速度慢等问题。四、总结总结来看，DEX相对于CEX有明显的安全优势，能够大幅降低人为因素导致的各种风险，不过目前底层公链的性能严重制约DEX的发展，导致用户体验远低于CEX。但随着DeFi项目逐渐活跃，市场上各类去中心化交易所正不断突破，试图多的市场份额。DEX和CEX的竞争不仅仅只是技术的竞争，更多的是经济模式、高性能的竞争。因此，目前各类交易所逐鹿中原，最终谁能雄霸天下还尚未定论。发布于 2020-09-02 10:39科技互联网区块链(Blockchain)​赞同 20​​7 条评论​分享​喜欢​收藏​申请

带你多方面认识 CEX 和 DEX - 知乎

带你多方面认识 CEX 和 DEX - 知乎切换模式写文章登录/注册带你多方面认识 CEX 和 DEX知乎用户BFhqHtCEX 是 Centralized Exchage 的简称 ，是指中心化交易所，DEX 则是 Decentralized Exchange 的简称 ，也就是去中心化交易所。知道创宇区块链安全实验室 基于此，多维度解析——交易所的中心化与去中心化到底有什么区别，以及分别有什么优劣势。交易过程CEX现在的大多数交易所都是中心化的交易所，如我们熟知的 火币、币安、OKEX 等。普通用户第一次购买数字货币大多都是在中心化交易所完成的，首先需要在交易所通过手机或者邮箱注册一个账号，为了能够正常交易，通常还需要进行 KYC （身份实名认证），KYC 通过才可以在交易所支付法币购买数字货币，然后才能在交易所自由交易。交易所的交易不受区块链技术的限制，不需要自己保管地址的私钥，交易由交易所程序内部撮合完成，实际就是平台数据库在各个账户中记账的过程。当你想把平台内的资产转移至其他交易所或者个人钱包，可以进行提币操作，平台会将资产转入指定的地址。DEX而去中心化交易所，如 Uniswap、SushiSwap、Curve 等，用户需要先在去中心化钱包中创建一个自己的钱包，保管并备份好私钥，将数字货币转入这个地址中，由于私钥只有你一个人知道，所以资产只能够由你一人进行操作。然后即可使用钱包登录去中心化交易所进行交易，登录实际就是授权去中心化交易所访问钱包的过程，钱包就是你的账户，当进入去中心化交易所页面时便理解为登录成功。找到需要的交易对就可顺利进行，交易完成后，资产可以在钱包中直接查看，无需再进行提币操作。二者区别CEX，是将资产存储与交易操作基于搭建交易所的中心化机构，完全依赖用户对机构的信任，风险很高。DEX，资产去中心化托管，交易全部上链，安全透明可查。安全性由于用户的资产集中在 CEX，资产的安全完全由交易所掌控，小的交易所存在诈骗和跑路的风险，大的交易所又会成为黑客或其他不法分子的重点目标，过去发生的历史事件也能够说明，平台并不能够保障资金的安全，如：MGEX 交易所卷款资金达数亿；DragonEx 交易所钱包服务器被黑客攻陷被盗资产不少于 500 万美元；币安 交易所被恶意软件与网络钓鱼攻击损失 4100 万美元；UpBit 交易所私钥服务器遭受攻击被转移超 580 亿韩元的 ETH；Bithumb 平台上市值近 2000 万美元的数字货币被盗，经调查该事件没有黑客入侵痕迹，是内部人员的监守自盗。而且 CEX 在身份认证中拿到了用户个人信息，这些数据很容易被泄漏，你是否接到过各种自称是数字货币交易平台客服的骚扰电话？DEX 中，因为不需要进行 KYC，也就没有个人信息泄漏的风险，资金都放在用户的钱包地址中，攻击变的更加分散，金额相对来说并没有那么大的吸引力。Dex 的安全性也是有前提的——必须要通过安全审计、提供 SSL/TLS 证书、并且提前在知名的漏洞赏金平台上发布漏洞赏金计划等一系列措施来规避安全风险。DEX 中只要用户提高安全意识保管好私钥，资产的安全就还是掌握在自己手中，不会存在像 CEX 中因人为因素产生的资产盗用、内部运营风险等情况。但对于不了解区块链的基本知识，不会使用钱包的小白用户，或许头部的中心化交易所会是更好的选择。毕竟世界上没有绝对的安全，建议不同人群需要基于自己的认知去选择适合自己的交易所。用户体验CEX 上通常是普通用户，因为门槛低，操作简单，交易速度快，不需要掌握区块链只是就能便捷的进行交易，只要平台稳定可信，就能够吸引很多的投资者。DEX 上通常是开发者和极客，他们对交易的安全性和隐秘性要求较高，了解区块链的底层原理，但随着 CEX 的安全事件频发和暴雷，越来越多的普通用户开始了解使用 DEX。交易费用CEX充币，用户个人钱包地址（或其他交易所）充值到当前交易所分配给用户的地址，目前基本都不会收取手续费。交易，交易所会收取手续费，直接从相应的币种里扣除，费用由用户承担。提币，交易所钱包充值到用户钱包地址（也可以是其他交易所的地址），会直接收取用户一定的提币手续费。DEX充币，使用 DEX 即表示已授权钱包权限，不存在单独的充币操作。交易，去中心化交易所也会收取手续费，比例通常在 0.1%-0.3%，会直接从交易的币种里扣除，交易实际产生的矿工费也需要自己承担。提币，交易完成后，资产可以在钱包直接查看，不需要进行提币操作。CEX 在交易、提币时都会被平台收取一定的手续费，每个平台、币种会有所差别，也会随着币价的波动而发生变化。而 DEX 看似仅在交易时产生了额外费用，但因为同时包含手续费和矿工费，目前以太坊网络拥堵，矿工费还一直处于一个较高的状态。所以 DEX 的交易成本通常不会比 CEX 低。未来趋势因为 DEX 相对于 CEX 有明显的安全优势，能够大幅降低人为因素导致的各种风险。随着技术的不断迭代，DEX 的技术越来越成熟，如今在上币、流动性、交易、运维、安全等方面有着较大的提升，也被越来越多的人看好，认为这将是未来的发展趋势，但目前 CEX 仍然占据主导地位，存在大量的用户群体，DEX 是否会超过 CEX，目前还未可知，由于各种需求始终会存在下去，DEX 与 CEX 必将长期共存。知道创宇唯一指定存证平台：www.attest.im联系我们：blockchain@knownsec.com知道创宇区块链安全实验室导航微信公众号@创宇区块链安全实验室微博@知道创宇区块链实验室知乎@知道创宇区块链安全实验室Twitter@KS_Blockchain发布于 2021-04-14 14:05区块链价值知道创宇去中心化交易所（DEX）​赞同 3​​添加评论​分享​喜欢​收藏​申请

一文看懂CEX和DEX的区别 - 知乎

一文看懂CEX和DEX的区别 - 知乎切换模式写文章登录/注册一文看懂CEX和DEX的区别俄罗斯区块2021年币安创始人赵长鹏身价达到900亿美元（相当于5733亿元人民币），超过农夫山泉董事长钟睒睒的4244亿元人民币，登顶华人首富。币安作为币圈交易所的龙头进入公众视野，币圈的交易所按类型分为CEX（中心化交易所）和DEX（去中心化交易所），本文和大家认识一下两种交易所。CEX——中心化交易所目前加密货币市场的交易主要由 CEX 主导，如币安，火币和 OKEx 等。CEX 的交易流程类似银行，用户把自己资产转入到交易所，在交易所的背书下完成币币交易，最后再把资产提取到自己的钱包。在这个交易过程中，CEX收取一定的手续费。CEX交易所不光提供交易，还有理财、合约（就是新闻里经常报道会爆仓的一种金融产品）。在中心化交易所开户需要通过 KYC 认证，上传自己的身份等个人资料。小白用户尤其喜欢使用这类型的交易所，因为集中式结构提供一个用户友好的平台，使购买和管理数字货币特别容易。中心化交易所的交易量通常明显高于DEX，因为网络节点不需要实时更新，因此交易速度非常快。CEX交易的本质是卖家把币转到CEX的账户托管，买家购买到的币也是转入在CEX里的子账户，只有把币提现到钱包，才真正属于用户。所以如果CEX跑路，无论买家还是卖家，在CEX开立账户的币都会不翼而飞。DEX——去中心化交易所去中心化交易所提供中心化交易所的核心交易功能，但流程会简化很多，省去了 KYC 和“转入”、“提币”的步骤（这两个步骤是典型的 CEX 才需要的步骤）。用户使用自己的地址（在 DEX 交易所申请，或者导入自己的钱包，但用户都掌握私钥）与 DEX 的智能合约地址交易。用户自始自终都握有地址和密钥，资产完全掌握在自己手中。与中心化交易所的不同之处在于，所有这些功能都是去中心化的。因为，DEX不是基于内部服务器和本身的IT基础设施，而是充当区块链上的去中心化应用程序（DApp）。DEX和CEX各自的优缺点1. DEX的优点匿名性匿名是在DEX上进行交易的主要原因之一。没有身份验证程序，没有KYC，也没有上传到服务器的个人文件。只需要注册一个加密货币钱包就可以交易，交易所和权威机构之间不存在个人数据交换。安全性DEX的币由用户自己保管，不存在交易所跑路的风险。DEX里任何用户都可以把交易对放到交易池子里，没有任何的限制。2. DEX的缺点效率较低DEX的交易通常比CEX慢得多，在DEX上的每笔交易都必须由矿工验证，特别是链上拥堵的时候，就会需要比较多时间才能交易，或者可能交易失败。专有概念理解门槛DEX的业务性质决定了会有些专门的专业术语门槛，比如无偿损失、滑点、抢跑攻击等，理解起来比较困难。DEX不能用法定货币交易，决定了它不适合初入币圈的小白。3. CEX的优势中心化交易所的用户界面即使对于初学者来说也很容理解，并且流程和程序可以快速内化，用户可以轻松简单地访问相应的交易选项。由于交易量大，CEX具有高流动性。交易所可以快速轻松地履行付款义务。中心化交易所的深度，保证了大量的买卖订单，以保证市场友好的交易。CEX基于个人和中央基础设置，这使得几乎实时的快速交易成为可能。领先的交易所的算法每秒可以处理数千个订单，交易所无需等待即可对不断变化对市场情况做出反应。且头部的中心化交易所提供种类繁多的数字货币，交易对数不胜数。同时，也可以使用法定货币进行存款和取款。4. CEX的缺点用户将加密资产存储在交易所，由于中心化交易所的钱包是集成式的，不在用户的控制范围内。私钥的所有权掌握在交易所手中，如果交易所泄露或遭到攻击，则用户的私钥和数字资产存在完全丢失的风险。CEX对项目方不友好，一般项目的币上主流的CEX交易所，都要交一笔大额的上币费。中心化交易所受监管机构、第三方提供商和法律法规的控制，比如Coinbase交易所就在纳斯达克上市。为防止洗钱，运营商需要收集其客户（KYC）的大量数据。这种规律性与加密货币的基本思想背道而驰。这里插播一个国际新闻，因为俄乌战争，Coinbase禁止了25000个俄罗斯的账户。网络上很多大V就说了，区块链不是去中心化的吗，怎么可以随意禁止别人账户？这里混淆了概念，区块链是去中心化的，但Coinbase是中心化的交易所，用户只要把交易所的币提到钱包，保管好私钥，谁也拿不了你的钱。在区块链的世界里，你的资产只属于你自己。发布于 2022-05-22 00:01区块链(Blockchain)加密货币交易所​赞同 7​​添加评论​分享​喜欢​收藏​申请

时隔一年，再看DEX和CEX的竞争和对比_腾讯新闻

时隔一年，再看DEX和CEX的竞争和对比_腾讯新闻

时隔一年，再看DEX和CEX的竞争和对比

中心化交易所由于“暗箱”等问题一直备受行业诟病，但即便这样，市场也无法轻松的抽身于中心化交易所，一方面是用户习惯已经养成，二是庞大的交易量都是依托该类交易所进行，正所谓“天下熙熙皆为利往”，中心化交易所已经奠定了作为交易基础设施的关键地位。但，这种地位在今年或许有着更多被挑战的因素存在。

CEX和DEX的“阵地战”

由于交易所存在巨大的盈利空间，所以一直以来，交易所数量如雨后春笋般的继续增补，据不完全统计，全球已经有419家交易所，当然这一领域的市场淘汰率非常高。除了本领域内的竞争，更不经意的强劲分羹者来自DEX布局者，该赛道在去年的发展势如破竹，凭借巨大的交易流动性，攫取了大量交易用户，其也一次又一次的被认为是取代CEX的最强对手。而在今年的大环境下，CEX发展变得越来越难。

从国内到国外，全球各主要地区对加密货币的交易环境进行了一系列管理。国内在上半年发布打击比特币等虚拟货币交易炒作行为并关停挖矿作业后，9月进一步发布了整治虚拟货币交易炒作的通知，对虚拟货币监管在升级。而在国外，韩国也下发了“最严监管”政策，要求加密交易所在9月24日前完成系列审核工作，同样的包括泰国、印尼、土耳其等亚洲国家同样都有了清晰的监管框架，即便还有众多的国家虽然没有颁布禁令，但也表态对加密货币市场持续关注。可以说，对于加密市场而言，全球的监管正日趋严格，而这对于买卖加密货币的交易所来说，压力自然不容小觑。

那么，在政策监管愈发明晰的环境中，是否意味着CEX的候补者DEX会迎来比之前更有发展的推动力呢。从政策的反应看，包括Binance、火币、CoinBene、BHEX等先后宣布关停或对中国地区用户进行限制。同步的，不少中心化交易所在清退风波影响下平台币出现了大幅度下跌。而与其形成鲜明对比的是，DeFi类代币却迎来了小幅上涨，包括Uniswap、dYdX、Aave、Compound和Sushiswap等DeFi蓝筹代币涨幅均超过10%。其中，去中心化交易所dYdX24小时交易量更是达到36.8亿美元，首次超越Coinbase的36.1亿美元。

这种超越在去年也同样上演。在去年的8月末，屡创新高的Uniswap 达到一个新的里程碑，其24小时交易量有史以来首次高于Coinbase，Uniswap 24小时交易量超过4.26亿美元，同期Coinbase Pro 24小时交易量则为3.48亿美元。一年时间，DEX和CEX的交易量都迎来了倍数级增长。但客观来说，从整体市值的对比来看，DEX的规模仍然很小，其并没有达到撼动CEX的程度。

DEX虽快速增长 但CEX仍难以撼动

按照比较宏观的说法来看，DEX受欢迎程度归因于在监管不确定或确定的地区越来越难使用中心化的服务提供商，也就是CEX，该类服务上变得越来越严格，也越来越难使用，而DEX不同，这是一个开放的、无需许可的系统，这些产品让用户不再通过第三方而直接进行交易。尤其是对于不断发展并积极吸收外部投资和资产的市场来说，我们发现DEX协议等创新项目的开发和使用越来越多。也就侧面说明了，加密货币的交易政策对CEX的限制或许为DEX提供了一些机会，而从整个行业的纬度来看，其稳步增长的源头来自于DEX本领域的迭代更新和新老项目的持续进击。

其实，去中心化交易所已经发展了很长一段时间，早在2014年V神再介绍以太坊的时候就提到了去中心化交易所，而直到2020年5月，DEX才真正的与中心化交易所相竞争，其活动所占的交易量份额才开始猛增，在9月份进入了与CEX竞争愈发白热化阶段，而到今年表现出稳中有升的态势，而这些活动主要由Uniswap、AAVE、1inch、DyDx推动，本赛道的内部竞争表现出非常多的升级看点，关于DEX的交易深度不足，无法支持大额交易且平台本身无法独立定价的问题，Uniswap类的DEX产品正在经历一系列的升级。

而且流动性的战争已经在Layer2上拉开序幕，在DeFi2.0的新阶段，性能将继续提升，随之在L2上部署的DEX也将更多，目前包括Uniswap V3、SushiSwap、DODO、Bancor等去中心化交易所都已在Arbirum上部署，但来源于网上的数据来看，在6月份，各DEX 24小时现货交易量中位居第一的Uniswap V3（L1）的仅占约占Binance的5.8%，而一些在L2不同侧链的头部DEX的24小时交易量只有千万量级，如PancakeSwap (BSC)和QuickSwap（Polygon)分别是$ 342,091,865和$ 208,976,311，并没有聚集更多用户和流动性。

(图片来源于网络）

在交易体验方面，除去在链上需要支付的Gas费，DEX的每次交易手续费已经与CEX们基本平齐，头部DEX支持的交易币种和交易对已经可以赶超头部CEX，包括了更多的长尾资产。

(图片来源于网络）

来到今年，DeFi市场保持较为稳定的增长率，截止目前，其总体价值锁定达1861亿美金，而这较大的来源都是依赖于DEX，来源于coingecko网站数据，DEX24小时交易量72亿美金，月访问人数达到1亿多次，总体呈现上升的走势。

（图片来源于coingecko）

而从交易量看，DEX和CEX还存在较大的差距，DEX目前排名第一的Uniswap（V3）24小时交易量有23亿美金，而在CEX领域，排名第一的Binance24小时交易量有317亿美金。二者对比下来，仍然无法同日而语。

（DEX交易量排名，来源CoinGecko）

（CEX交易量排名，来源CryptoMarket）

这种巨大差距也不能说明中心化交易所可以一劳永逸，数据显示其流出量在不断增加。在上个月，有超过10亿美元价值的以太坊在24小时内从中心化交易所移出，而交易所在比特币供应自今年三月份开始也出现了稳步流出，根据链上分析公司Glassnode的数据，中心化交易所的BTC储备已降至2018年2月以来的最低水平。这也说明，主流币在交易所的余额变得越来越少，即中心化交易所的供应不断减少，而这种代币转移流出一定程度上也会给去中心化交易所带来机会。

来源于Coingecko的数据，在今年上半年，去中心化交易所产生的总交易量从1月份的1000亿美元增加到5月份的3000亿美元。DEX已成功地将业务从中心化交易所（CEX）吸引过来。1月至6月期间，DEX的总交易量翻了一倍，CEX的增长则显得较为平缓，从1.2万亿美元增至1.3万亿美元。

（图片来源于网络）

哪些项目正在推动DEX发展？

Uniswap

Uniswap作为DEX领域的热潮领军项目，其一直都保持较为活跃的高流通量，已经奠定了相当于CEX中的币安般的地位。其在升级迭代中一直走在前沿，目前，该项目经历了UniswapV2到Uniswap V3的升级，其提供了更为聚合的流动性、灵活的费率、以及更为先进的流动性预言机。上线以来，Uniswap V3在短短的几个月里就已经跃居去中心化交易所（DEX）交易量的榜首位置。

1inch

1inch由币安交易所孵化，是行业的主要参与者，该项目自今年上半年，通过DEX聚合交易服务，用户数量实现了从8万到60万的增长，在当时是为数不多表现出强劲增长的基于DEX聚合器项目，来源于官方介绍，他们有着低Gas成本、免费交易、安全智能合约、支持BSC、Polygon、Optimistic Ethereum，并且提供了移动应用程序。9月底，1inch Network宣布1inch聚合协议和1inch限价订单协议上线Arbitrum One。

Zenlink

波卡生态跨链 DEX 协议 Zenlink，其 有两个核心功能，一是Zenlink DEX 模块，项目方可以通过插拔方式部署一键发DEX的业务，二是它提供了基于XCMP的跨链DEX协议，能把所有平行链的流动性打通的同时实现跨链交易功能。虽然项目仍然处于开发期，但已经和包括Plasm、Chainlink、Phala等众多项目建立合作，而放置于波卡的庞大跨链网络中，其自身也将获得更多的资源机会，当波卡平行链真的开始工作起来，它的未来价值也将极具可看性。目前，Zenlink刚刚发布了经济白皮书，且计划于Kusama和Polkadot网络发行同一套ZLK Token。

Serum DEX

Solana新公链的爆火直接带动了其生态内项目的走高，其中Serum更是其中的佼佼者，备受行业关注，该项目于2020年DeFi元年开启，建立基于Solana的去中心化交易所，意在将CeFi的高质量交易经验带入DeFi，具有中心化限价订单簿模式、具有极快的速度。可以预测，当建构起所有基础性应用的核心驱动力后，Serum将获得许多真正面向巨量用户的项目在其上进行构建。

总之，未来布局DEX的项目方只多不少，而其内部竞争也将变得越发激烈。曾经看起来不可撼动的中心化交易平台们，似乎在这场DEX升级浪潮中正在逐步被追击，但“DEX取而代之”的追赶或反超论调还需要一定的时间，且在未来二者应该是互补融合、相互补充的关系，共同满足未来用户的交易需求，提供给用户更多的交易选择。不过从短期来看，DEX的交易量显然无法与主流CEX相抗衡。在未来DEX会有机会占据很大的市场份额，但是CEX依旧占据主导地位。

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AccuMea CEX电荷异构体峰鉴定

作者：上海测简奕科技有限公司

浏览：

发表时间：2022-04-13 16:20:00

来源：公众号:AccuMea

电荷异构体是重组蛋白类药物的关键质量属性，对重组蛋白类药物的稳定性、溶解性、免疫原性、体内外生物学活性和药物动力学功能发挥具有重要的影响。选择一种灵敏度高、特异性强的蛋白电荷异构体检测分析方法，是控制和稳定重组蛋白药物生产质量的有效手段。电荷异构体作为衡量生物制品质量的关键属性，可以反映出抗体生产工艺的稳定性，因此成为整个生物制品研发、工艺开发和生产阶段的重要评估指标。阳离子交换色谱（CEX）是蛋白类药物电荷异构体分析的主要技术之一。通过CEX可以得到蛋白的电荷异构体各峰的相对含量，但不能得到各电荷异构体峰的结构信息。电荷异构体各峰的鉴定是药物深度表征研究的需求，也能够为研发中工艺开发提供技术支撑，指明优化的方向。测简奕开发了在线2D-CEX-RP-LCMS和离线CEX-RP-LCMS方案，可以对CEX各电荷异构体峰做全面、深度的鉴定分析。目前，测简奕已为十多家生物医药客户提供了CEX电荷异构体峰鉴定服务，现已完成的项目数量超过20个，其中10多个项目已进行IND申报。安捷伦在线2D-CEX-RP-LCMS用于蛋白电荷异构体分析案例：蛋白CEX图谱安捷伦在线2D-CEX-RP-LCMS系统采用在线2D-CEX-RP-LCMS系统，对各峰进行分析，鉴定结果如下：安捷伦离线CEX-RP-LCMS用于蛋白电荷异构体分析案例：蛋白CEX图谱对P1-P6峰进行收集后，进行纯度确认：通过LC-MS测定各收集峰分子量，结果如下：对于Peak6，检测中发现，Peak6 在线2D-CEX-RP-LCMS结果主峰分子量148041Da，从分子量和出峰顺序推测来源于为天冬氨酸琥珀酰亚胺化；而在离线收集Peak6后进行质谱分子量分析，未见明显修饰峰，且从Peak6纯度验证的色谱图中可以看到，在收集的Peak6馏分中，Peak6已明显变为Peak4和3。说明了Peak6在收集和浓缩处理的过程中已发生变化。各收集峰经酶解后，采用LC-MS质谱，在肽图水平对各峰进行鉴定，分析结果如下：该案例通过在线2D-CEX-RP-LCMS和离线CEX-RP-LCMS方案对CEX主峰、酸性峰和碱性峰做了全面鉴定。在线和离线鉴定技术各有利弊，相互补充。在线技术简单快速，避免了样品收集引入的变化，在线技术主要是从分子量水平对峰进行鉴定；离线技术可以从肽图水平对脱酰胺等修饰做深入分析，需要注意的是，在样品离线收集和样品处理过程中峰组分可能发生变化，需要在线技术相互验证。

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发表于 Nov 16, 2023

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随着区块链技术的出现，因其去中心化而备受赞誉，加密货币交易所等中介组织的新范式已经出现，为买家和卖家提供服务。从历史上看，加密货币交易主要是中心化的，所有交易都必须通过其特定的系统和基础设施。集中式加密货币交易所（CEX）是一个提供一系列服务的平台，包括加密货币交易的交易平台、注资和提款等账户服务以及客户支持。这些交易所是买卖加密货币的主要选择，与去中心化交易所（ DEX ）相比，它们因其便利性和用户友好性而受到青睐。在当今的加密货币领域，交易者面临着 CEX 和 DEX 之间的选择。为了做出明智的决策，了解集中式和分散式服务的细微差别，权衡各自的优缺点至关重要。这些知识对于选择加密资产交易的首选模型至关重要。集中式加密货币交易所的运作方式通常与银行类似。通常，它们要求用户放弃对其密钥的控制，尽管这并不是所有 CEX 的普遍做法。了解 CEX 是什么、它的独特优势以及它对加密行业成功的重要性对于任何想要从事加密货币交易的人来说都是至关重要的。集中式和分散式这两种类型的交易所都是加密经济的重要组成部分，提供不同的好处和功能。它们在提高可访问性和易用性方面发挥着至关重要的作用，特别是对于加密货币领域的新手来说，促进美元或欧元等法定货币与加密货币的兑换。了解这些交易所是探索复杂的加密货币交易世界的第一步。什么是集中式加密货币交易所（CEX）？集中式加密货币交易所（CEX）是由单一实体拥有和运营的平台，充当数字资产市场中买家和卖家的中介。该中央机构为支持的代币提供流动性，使用订单簿系统来确定价格，类似于传统的银行业务。用户将资金存入交易所的账户，然后交易所充当托管人，安全、公平地管理这些资金。 CEX 是在线交易平台，使连接到互联网的用户能够参与购买、出售和交换加密资产。作为私营公司，它们在各自司法管辖区的法律和监管框架下运营。要参与，用户必须创建一个帐户，并且大多数 CEX 都需要了解您的客户/反洗钱 ( KYC /AML) ID 验证。交易所使用订单簿来匹配买家和卖家，订单要求以特定价格购买或出售一定数量的加密货币。该系统聚合用户订单，通过专用软件匹配并执行相应的买卖订单。 CEX 的著名例子包括Binance 、 Coinbase 、 Bybit 、 Gemini 、 Kraken和Kucoin 。这些平台不仅促进加密货币交易，还充当做市商，为其支持的代币提供流动性。此外，他们将所有交易记录在所交易的数字资产对应的区块链上，经过彻底审查后决定哪些代币可以上市。它们还提供交易相关数据的访问权限，供投资者和其他感兴趣的各方进行分析。通过利用区块链技术，中心化交易所消除了对中间经纪人的需求，因为交易直接在交易所的界面内进行结算。加密货币交易所的这种演变标志着数字资产交易方式的重大转变，为全球用户提供了更加简化和安全的方法。中心化交易所（CEX）如何运作？中心化加密货币交易所（CEX）在数字资产市场中发挥着多方面的作用，主要侧重于撮合订单、充当清算对手方和托管人。这些平台接收来自个人和机构客户的订单，以相同的价格匹配买卖订单，或充当做市商以提高流动性和执行速度。 CEX 管理全面的订单簿、买卖请求的集合，并可能会收取访问此交易数据的费用。作为清算对手方，中央交易所创建了一层匿名性，表现为所有匹配订单的唯一对手方，从而隐藏了个别买家和卖家的身份。这种方法可确保交易流程得到有效管理，履行所有义务并在账户之间正确转移资产。作为托管人，CEX 保护用户账户中持有的现金和加密资产。它们允许各种形式的存款，包括美元和欧元等法定货币，以及比特币 (BTC) 和以太币 (ETH) 等加密货币。一旦存入，这些资产将由交易所保管，类似于银行在金库中保管资金的方式。此外，作为中心化实体，中心化交易所受到严格的监管。他们必须遵守了解你的客户 ( KYC )、反洗钱 ( AML ) 和反恐融资 ( CFT ) 等法律和协议。鉴于这些交易所处理数十亿美元并为全球数百万人提供服务，这种监管监督至关重要。他们的运营必须透明、高效，防止市场操纵并确保资产价格的完整性。 Gemini和The Block等报告的数据凸显了 CEX 在加密货币市场中的主导作用。截至最新数据，CEX 仍占加密货币市场交易量的主要部分，凸显了它们在行业中的关键作用。了解这些动态对于任何想要参与加密货币市场并选择适合其交易需求的交易所的人来说至关重要。集中式VS集中式去中心化交易所（CEX VS DEX）：有什么区别？去中心化交易所（DEX）源于去中心化金融（ DeFi ）运动，提供了与中心化交易所（CEX）截然不同的模式。 DEX 作为点对点市场运作，没有中央机构，依靠区块链技术执行交易，不需要遵守传统的监管标准。与 CEX 相比，这通常会带来更低的费用。 DEX 的主要特点包括使用自动做市商 ( AMM ) 协议和智能合约来确保流动性和订单的及时执行，而无需 CEX 使用的传统订单簿。加密世界对自我托管的需求不断增长，推动了 DEX 的普及。它们允许用户保持对其资金的控制，直接连接非托管钱包进行交易。这种方法提供了显着的匿名性，因为交易仅与钱包地址绑定。著名的 CEX 包括 Binance、Coinbase 和 Kraken，每个都有自己的功能和用户体验。 CEX 和 DEX 的共同目的是促进加密货币交易，但在操作和用户体验方面有所不同。由单一实体运营的中心化交易所提供客户支持和更加用户友好的界面，但要求用户放弃对其资金的托管，并且通常收取更高的交易费用。 CEX 的中心化性质也使它们更容易受到攻击和破产，正如 2022 年所见。另一方面，DEX 在区块链智能合约上运行，提供自我托管、数据保护和隐私，但进入门槛较低它们使用起来可能更加复杂，并且缺乏直接的法定货币支持。选择使用 CEX 还是 DEX 取决于个人偏好和需求。虽然 CEX 方便进行法币到加密货币交易和短期资产持有，但建议使用 Bitcoin.com 钱包等自我托管解决方案进行中长期持有，并在可能的情况下探索去中心化替代方案。去中心化交易所因其透明度、资金自我托管以及通过流动性池和农业赚取收益的机会而受到推荐，尽管它们目前很复杂且缺乏法定入口。这种使用 CEX 和 DEX 的平衡方法可以为用户提供两个平台的好处，同时减轻各自的风险。

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加密货币交易所的未来：DEX和CEX之战-36氪

加密货币交易所的未来：DEX和CEX之战-36氪

如何看待全国首款支持多环境开发的 IDE —— CEC-IDE？ - 知乎

如何看待全国首款支持多环境开发的 IDE —— CEC-IDE？ - 知乎首页知乎知学堂发现等你来答​切换模式登录/注册集成开发环境开发环境IDE (集成开发环境)如何看待全国首款支持多环境开发的 IDE —— CEC-IDE？CEC-IDE 以 “做好数字政府创新应用的孵化器和技术管理的总抓手” 为使命，自主研发，提供多种主流语言的开发环境，是国内首款同时支持麒麟、统信、W…显示全部 ​关注者112被浏览361,693关注问题​写回答​邀请回答​好问题 3​3 条评论​分享​64 个回答默认排序知乎用户b6K0lW​ 关注为什么CEC2.0出来之后，说IDE套壳vs code的声音几乎没有了？为什么CEC3.0出来之后，说IDE套壳vs code的声音几乎没有了？为什么CEC4.0出来之后，说IDE套壳vs code的声音几乎没有了？发布于 2023-08-25 14:15​赞同 508​​24 条评论​分享​收藏​喜欢收起​Jackpop​哈尔滨工业大学 计算数学硕士​ 关注工作6六年，做过很多toG的项目，对于这种现象已经再熟悉不过了。做过toG项目的都知道，人傻钱多，最终产出是什么、好用与否好用，压根不重要，看上去炫酷、听上去高大上，能够支撑相关人员向上汇报，蒙混过关就好。尤其是像广东这个地方，更是如此，有钱没处花，拉着三五家公司，合起伙来把利益平分一下，各取所需。这个所谓的“自主研发”主要负责公司是数字广东，之前也接触过很多类似数字xx的公司，这类基本可以无脑的判断就是国资背景的公司，我看了一下这家公司的股权架构，也印证了我的想法：这种模式太熟悉了，很多toG项目为了掩人耳目，一般不会指定独家供应商，大多数情况下会拉着几家甚至几十家公司，装模作样的弄个招投标，有国企，有私企。其中关联方国企往往拿着最多的钱，干着最少的活，而真正有实力的私企只能拿着最少的钱干着最苦逼的活，即便我所在的是一家top级、在他人看来很光鲜的大公司，在整个项目里也是干着类似打杂的事情，处处要看有背景集成商的眼色。这种情况已经见怪不怪了。但是！像数字广东这么赤裸裸挑战下限的，还真是头一次，这和洗钱有啥区别？所谓的“自主研发”，不仅界面、图标不换，甚至很多模块的信息还标注着Microsoft。拿了那么多钱，抽出几万块钱找几位UI设计、前端几天就可以搞定的事情，换个样子，有那么困难吗？从开发者的角度，我觉得这也可以称得上是职业生涯的一大耻辱了，可以写到档案里了。产品发布上线，至少走一下标准的发布流程吧？开发、自测、测试、灰度、发布，为什么我感觉背后的这帮开发人员就像小孩子过家家一样，每天混吃等死，突然有一天醒来发现要发布了，不管三七二十一就把代码push到仓库给发布了呢？骗钱也要做全套啊！真的是一点职业操守都没有！发布于 2023-12-09 22:28​赞同 4​​添加评论​分享​收藏​喜欢

单克隆抗体中的酸性和碱性种类 - 知乎

单克隆抗体中的酸性和碱性种类 - 知乎首发于生物医药知识聚合社区切换模式写文章登录/注册单克隆抗体中的酸性和碱性种类佰傲谷存在电荷、分子量或其他性质不同的多个变异体是单克隆抗体(mAb)的共同特征。与主要物种相比，这些电荷变体通常被称为酸性或碱性。主要物种的化学性质通常是众所周知的，但了解酸性和碱性变体的化学性质，以及这三个物种之间的差异，对于工艺开发和配方设计至关重要。然而，完全了解酸性和碱性物种是具有挑战性的，因为已知这两个物种都包含多种修饰。本文将简单介绍用色谱技术分离的酸性和碱性物种的表征，及其对抗体结构、稳定性和生物学功能的影响。基于电荷的分离技术由于多个翻译后修饰和降解事件，单克隆抗体(mAb)的生化和生物物理特性具有异质性。用等电聚焦凝胶电泳(IEF)、毛细管等电聚焦(cIEF)凝胶电泳、阳离子交换层析(CEX)和阴离子交换层析(AEX)等基于电荷的分离技术分析mAb时，经常会观察到变异。与主要物种相比，这些变体通常被称为酸性或碱性物种。当用基于IEF的方法分析抗体时，酸性物种是表观等电点较低的变体，碱性物种是表观等电点较高的变体。当用基于色谱的方法进行分析时，酸性物种和碱性物种是根据它们相对于主峰的保留时间来定义的。酸性种是早于CEX主峰或晚于AEX主峰洗脱的变体，碱性种是晚于CEX主峰或早于AEX主峰洗脱的变体。虽然人们普遍同意使用基于离子交换和色谱的方法观察到的酸性和碱性物种的分布和数量，但由于分离机制的不同，可能存在细微的差异。IEF根据总电荷差(表观PI)来分离抗体变体，但除了总电荷外，电荷分布在层析分离抗体变体中起着关键作用，因为它可能会影响抗体与柱树脂的相互作用。例如，当用IEF分析时，具有两个重链上的天冬氨酸(Asp)或一个重链上的一个天冬氨酸(Asp)和另一个重链上的一个异门冬氨酸(IsoAsp)的重组单抗在IEF分析时具有相同的等电点，因此，没有预期的等电点差异，然而可以通过强阳离子交换(SCX)柱来分离。这表明，基于色谱的分离并不仅仅依赖于总电荷，因为即使在没有电荷差异的情况下也可以实现分离。因此，尽管分离的主要驱动力是电荷差，但基于理论计算或基于IEF方法的实验确定的表观等电点可能不足以预测色谱分离方法的洗脱顺序。主要物种主要种类是在色谱图上作为主峰洗脱的抗体。主要种类不一定对应于未修饰或未降解的抗体。事实上，主峰通常由三种典型的翻译后修饰的抗体组成：(1)N-末端谷氨酰胺(Gln)环化为焦谷氨酸；(2)去除重链C-末端赖氨酸(Lys)；(3)CH2结构域中保守的天冬酰胺(ASN)残基与中性寡糖的糖基化。N-末端谷氨酰胺编码在轻链和重链中的一条或两条基因中，合成后可以自发环化形成焦谷氨酸(PyroGlu)。大多数抗体在分析时含有N-末端焦谷氨酸，而不是原来的谷氨酰胺，因此洗脱为主峰。类似地，重链C-末端赖氨酸也编码在重链基因中。羧肽酶对C端赖氨酸的不完全去除会导致抗体中没有、有一个或两个C端赖氨酸残基。主要品种通常为没有任何C端赖氨酸的抗体。CH2结构域中保守的ASN残基被N-连接的寡糖糖基化。哺乳动物细胞培养的重组mAb的主要糖型为核岩藻糖基化的复合双天线结构，其末端有0、1或2个半乳糖残基。酸性物种酸性物种被定义为在CEX分析中早于主峰或在AEX分析中晚于主峰的抗体变异体。图1总结了酸性物种形成的主要原因。图1. 酸性物种形成的主要原因唾液酸通常被报道有助于酸性物种的形成。在NS0细胞中表达的重组IgG1抗体的酸性组分中检测到唾液酸。在CHO细胞系中表达的重组IgG1抗体的酸性组分中也含有较高水平的唾液酸。用唾液酸酶处理后，发现酸性物种的百分比大大降低，这表明唾液酸的存在是这些酸性物种的主要原因。ASN残基的脱酰胺化也被广泛报道为酸性物种的主要原因。脱酰胺化既发生在可变区，特别是在暴露的和灵活的互补决定区(CDR)，也发生在恒定区(图2)。CDR区ASN残基的脱酰胺化几乎肯定会导致酸性物种的产生。虽然isoAsp和Asp侧链上的PKA差异很小，但轻链CDR1上带有isoAsp33的抗体及其Fab片段的洗脱时间要晚于相同位置上带有Asp33的抗体，而且两者都比含有原始ASN残基的抗体洗脱得更早。具有相同位置的 isoAsp 或 Asp 的抗体在不同保留时间洗脱的事实表明影响电荷分布的构象差异，因此是抗体与柱树脂相互作用的证据。CH2区的与氨基酸序列LNGK， CH3结构氨基酸序列SNGQPENNYK和 LHNHYTQK，以及轻链恒定区LLNNFYPR的脱酰胺化也已报道。图2. ASN残基的脱酰胺化虽然不像唾液酸和脱酰胺化那样被广泛观察到，但其他修饰也被证明会导致酸性物种的产生。例如，当使用AEX分析时，含有三硫键的抗体(最先在重组人IgG2中发现)比主峰洗脱得晚，因此对应于酸性种类。一种高甘露糖含量的抗体变体也在重组mAb的酸性部分中略有富集，尽管高甘露糖低聚糖和具有核心岩藻糖的复杂双天线低聚糖之间没有电荷差异。这再次强调了基于色谱的分离不仅仅基于电荷差异。糖基化，还原糖与赖氨酸残基的侧链或N-端伯胺之间的反应，由于正电荷的中和，导致酸性物种的形成。酸性种类对结构、稳定性和功能的影响由于导致酸性物质产生的各种修饰对结构、稳定性和功能的潜在影响高度依赖于它们的位置。由于柔性铰链区，位于Fc区的修饰可能不会对Fab片段产生显著影响。例如，唾液酸的存在不会影响抗体效力。位于Fab区的修饰，特别是CDR区的修饰，最有可能对抗原结合和效力产生实质性的影响。图3总结了脱酰胺化的影响。铰链区的三硫键的存在已被证明不会影响IgG2抗体的热稳定性。Lys糖基化可以在不改变抗体构象的情况下增加聚集体的形成，这表明Lys糖基化引起的表面正电荷减少可能会降低抗体分子之间的排斥力。抗体重链 CDR2 中 Lys 残基 (K65) 的 10% 糖基化不会影响其结合亲和力。图3. 脱酰胺化的影响碱性物种碱性物种被定义为在CEX分析过程中晚于主峰、在AEX分析过程中早于主峰洗脱的物质。图4总结了导致碱性物种产生的修饰。形成碱性物质的一个主要原因是C末端Lys的不完全去除。由于额外的正电荷，具有重链C-末端Lys的mAb比主要物种更碱性。羧肽酶B(CPB)能特异性去除C端碱性氨基酸残基，对比CPB消化前后抗体的色谱图，可以清楚地证明C端赖氨酸对碱性物种形成的贡献。图4.导致碱性物种产生的修饰对碱性物种有贡献的另一种常见修饰是轻链或重链的N-末端谷氨酰胺(Gln)不完全环化为焦谷氨酸，或两者兼而有之。谷氨酰胺最初是在基因中编码的，但它可以发生自发反应，产生焦谷氨酸(PyroGlu)。含有原始谷氨酰胺的抗体具有比主要物种更高的表观等电点，因此被称为碱性物种。天冬氨酸异构化已被广泛报道。与脱酰胺化类似，异构化在CDR区域频繁发生，很少在恒定区发生。当用CEX分析时，重链CDR3中含有isoAsp102的重组单抗比含有原始天冬氨酸的抗体洗脱得晚。琥珀酰亚胺是天冬酰胺脱酰胺化和天冬氨酸异构化的常用中间体，也有助于碱性物种的产生。CDR区琥珀酰亚胺为天冬氨酸异构化产物的重组mAb的洗脱时间晚于CEX相同位置天冬氨酸的抗体洗脱时间。以琥珀酰亚胺为ASN55去酰胺化产物的抗体在CEX的碱性区域洗脱出重链CDR2。琥珀酰亚胺作为天冬氨酸74异构化产物存在于CDR区外，也导致碱性物种的形成。其他几种修饰也能产生碱性物种。Fc区两个保守蛋氨酸(Met)残基氧化的抗体在碱性区域洗脱。mAb CDR2区域的Met残基也会导致碱性物种的产生。除去重链C-末端赖氨酸和前一个甘氨酸残基后的脯氨酸残基的酰胺化也可导致碱性物种的形成。重链可变区有未形成二硫键的重组mAb比CEX柱上有完整二硫键的抗体洗脱得晚，因此代表一个碱性物种。具有一个糖基化重链和一个带有短寡糖的重链的抗体也从CEX中晚洗脱出来作为碱性物种。一个非共价Fab-Fab二聚体在WCX-10柱上的洗脱时间晚于Fab单体。抗体聚集体和片段已被检测为碱性物种。由于碎片也以酸性物种的形式富集，碎片的电荷性质可能在影响其色谱洗脱顺序方面起着关键作用。碱性种类对结构、稳定性和功能的影响与关于酸性物种类似，形成碱性物种修饰的位置是否对结构、稳定性和生物功能有任何影响是至关重要的。抗体的N端或C端的修饰不会对抗体的结构、稳定性和功能产生实质性的影响，因为这些区域是高度暴露的，并且不是任何配体结合位点的一部分。含有两个重链N-末端焦谷氨酸的抗体效价与含有一个焦谷氨酸和一个谷氨酰胺的同一抗体的效价没有差异。C-末端赖氨酸不影响重组IgG1抗体的热稳定性，也不影响补体依赖性细胞毒(CDC)介导的效价。去除Lys和Gly后C末端脯氨酸残基的酰胺化对抗原结合或Fc效应功能没有影响。与N-末端或C-末端区域的修饰相比，其他区域的修饰更有可能对结构、稳定性和生物功能产生实质性影响。具有不成对的二硫键的FAB的效力仅为含有完全形成的二硫键的FAB的~28%。以isoAsp102为异构化产物的含有抗体的分离组份的效价仅为含有原始Asp102残基的主峰组份的9-21%。一些研究已经证实了琥珀酰亚胺的形成对抗原结合亲和力和效力的影响。有研究报道，与具有原始 Asn 残基的 Fab 相比，在重链 CDR2 中包含琥珀酰亚胺 55 的 Fab 片段显示出结合亲和力降低 50%，与具有原始 Asn 残基的抗体相比，具有琥珀酰亚胺的抗体的效力降低了 70% 。在轻链CDR1中具有琥珀酰亚胺32的Fab具有16%的结合亲和力和~42%的效力。Fc区Met残基的氧化不影响重组mAb的抗原结合力和效价；然而，它确实引起了构象变化，主要是在CH2结构域，导致热稳定性降低和聚集倾向增加。由于两个Met氧化位于多个配体的结合位点附近，这些残基的氧化减少了与蛋白A、蛋白G和FcRn的结合，但对Fcγ受体结合的影响很小。此外，这些Met残基的氧化导致体内半衰期显著缩短。差示扫描量热法(DSC)测定重链CDR2区Met残基的氧化导致抗体热稳定性降低。酸性物种和碱性物种的表征策略虽然馏分收集几乎是彻底表征酸性和碱性物种的第一步，但在馏分收集之前通过酶消化确定唾液酸对酸性物种的贡献和C-末端赖氨酸对碱性物种的贡献可能是有益的。唾液酸和C-末端赖氨酸都可以在自然条件下被酶消化特异性地去除，而这种条件不会对抗体结构产生实质性的影响。单独使用唾液酸酶可以很容易地去除唾液酸，或者使用PNGaseF可以很容易地与整个N-连接的寡糖一起去除唾液酸。C端赖氨酸可以通过CPB消化很容易去除。比较这些酶处理后酸性或碱性物种的百分比，将确定这些修饰对酸性或碱性物种总数的贡献。在许多情况下，加速样本被用来产生更高水平的酸性或碱性物种，用于馏分收集。数据然后外推，以确定在非加速药物物质中存在的极低水平的酸性和碱性物种的性质。然而，观察到药物物质和加速样品中的酸性物种和碱性物种具有相同的保留时间，这可能也不足以支持它们是由于相同的修饰而形成的结论。通常需要进一步的证据来证实在不同条件下产生的酸性物质和碱性物质在性质上是相同的。即使修改的性质相同，机制也可能不同。例如，Met256和Met432的氧化。两种残基都被氧化或者它们都不在药物物质中的一条或两条重链上并且在加速稳定条件下被氧化。然而，常用的tBHP化学氧化导致两个重链上的两个Met残基被随机氧化。控制分析人工产物的水平对于表征酸性和碱性物种也是至关重要的。在收集碎片和准备样品以进行详细分析时，可以很容易地引入人工制品。首先，在馏分的收集、浓缩、缓冲液交换和储存过程中，不能完全避免将馏分暴露在不同的pH、搅拌、室温和冷冻/解冻循环中。因此，诸如聚集、氧化和脱酰胺化之类的修饰可以作为人工产物产生。小编总结在单抗产生过程中，常可观察到酸性和碱性物种。完全消除酸性和碱性物种是不切实际的，也是没有必要的。有一些可能是重组单抗所特有的修饰，它们或者与特定的宿主表达系统相关或者发生在生产和配制过程中(例如，硫代硫化物修饰)。对生物功能的影响高度依赖于修饰的部位和水平。对于定位于Fc区域的修饰，即使存在更高水平的修饰也可能不会对结合亲和力产生直接影响。同样，定位于Fab区的修饰可能不会影响Fc相关功能，如受体结合。然而，在许多情况下，完全理解酸性物种和碱性物种的性质仍然是具有挑战性的。在任何情况下，都有必要评估酸性或碱性物种与主峰在稳定性和功能方面的差异。修饰可能是关键质量属性(CQA)或关键过程属性(KPA)。因此，酸性和碱性物种的信息对于建立与最终目标的可比性和相似性至关重要，以确保治疗性重组mAb的有效性和安全性。参考文献1. Chromatographic analysis of the acidic and basic species of recombinant monoclonal antibodies.2. A new tool for monoclonal antibody analysis.3. Charge-based analysis of antibodies with engineered cysteines.4. Characterization of N-Linked glycosylation in a monoclonal antibody produced in NS0 cells using capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection.FYI：总结生物医药更多知识点，敬请关注公众平台「佰傲谷BioValley」部分图源网络，侵权联删编辑于 2021-09-29 16:11抗体单克隆抗体酸碱性​赞同 12​​添加评论​分享​喜欢​收藏​申请转载​文章被以下专栏收录生物医药知识聚合社区垂直生物科技领域，依托媒体矩阵，为生物制药助